不同运动强度训练对大鼠骨骼肌细胞Bcl.2.FAS表达的影响

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基础医学骨骼肌是运动的动力装置,人体的一切运动主要是通过肌肉组织的收缩与舒张完成的,因此肌肉组织的损伤毫无疑问会影响人体的正常运动功能,严重影响运动员和从事重体力劳动者的工作能力。超负荷运动训练所导致骨骼肌的损伤及其恢复是广大教练员、运动员和运动医务工作者所面临的一个难题,目前针对骨骼肌损伤的防治有许多方法,但是效果都不确定。本探讨从细胞凋亡角度,探讨运动与骨骼肌细胞凋亡关系及在骨骼肌运动损伤发生、拓展中的作用,为骨骼肌运动损伤的防治提供新的途径。
    动物与材料实验动物:SD雄性大鼠40只,8周龄,体质量220~240g,来源:郑州大学实验动物中心。玻璃钢游泳池(自制,1 5 0 c m 3×60cm3×70cm3,水深60cm,水温31~32℃);Bcl-2、FAS基因蛋白检测试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司)。
    动物模型大鼠购回后,筛选具有奔跑能力的40只随机分为对照组(n=12),1h训练组(n=16)和力竭训练组(n=12),运动方式为无负重游泳。对照组平时不运动,饲养条件与运动训练组相同;1h训练组前3d适应性游泳30min,并在1周内逐渐延长至60min,每天游泳1次,共8周;力竭训练组前3d适应性游泳30min,1周内延长至120 min,1周后对大鼠进行力竭性训练,前5周每天1次,每周6次,最后2周每天早晚1次,每周6d。力竭标准:①游泳动作明显失调,不能再坚持;②沉入水底3s不能回到水面。发现上述情况及时捞起,用吸水纸擦干,置于笼中休息5min后再进行游泳训练,训练时间不少于2h。
    取材大鼠末次游泳训练后24h称质量,2%水合氯醛溶液腹腔内麻醉。迅速并完整切除右侧腓肠肌,4℃预冷生理盐水洗净血液,滤纸吸干肌肉组织表面水分,放入10%福尔马林溶液中固定。标本固定24~28h后,常规石蜡包埋,连续切片6~8厚度4um,用涂有APES载玻片贴片,60℃烘烤1h,使组织紧贴于玻片,放入标本盒,置4℃待用。1.4骨骼肌细胞Bcl-2、FAS基因蛋白的检测骨骼肌细胞Bcl-2、FAS基因蛋白表达的检测采用免疫组织化学(SP法)方法,根据染色程度及染色阳性细胞占肿瘤细胞总数百分比综合计分。
    按照阳性细胞比例计分:<10%为1分,10%~50%为2分,>50%为3分;按染色强弱计分:阴性为0分,淡染色为1分,中度染色为2分,深度染色为3分。以二者之积计总分:总分<3为阴性,3≤总分<6为阳性,总分≥6为强阳性。1.5统计学分析所有数据均采用SPSS 12.0软件进行统计学处理,采用χ2检验及spearman等级相关分析,显著性水平,α=0.05。2结果经过8周的运动训练后,各组大鼠的骨骼肌细胞均可见到Bcl-2基因蛋白的阳染细胞。1h训练组中,有4例呈阳性表达,有12例呈强阳性表达;力竭训练组中只有6例呈阳性表达。

[正文图表略.]
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